三級甲等綜合醫(yī)院國營
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丁型肝炎抗體的測定原理:采用雙抗體夾心ELISA法。先用去污劑(Tween20或NP40)裂解在外面的HBsAg膜,則釋放出的HDVAg與包被在板上的抗-HDVIgG結合,洗滌后加入酶標抗-HDV,顯色為陽性,無色為陰性。RIA法原理基本同上述。
試劑:國內有商品化試劑盒供應,內含HDV包被反應板(條),抗HDV-HRP應用液以及抗HDV陰、陽性對照血清,底物液,終止液等試劑。
操作方法:按試劑盒使用說明書進行操作。
(1)加樣品:在包被反應板各孔內加入樣品50μl,每次檢驗設陰、陽性對照,37℃保溫1h,洗板3次。
(2)加酶結合物:每孔加入抗HDV-HRP50μl,37℃保溫1h,洗板5次。
(3)顯色:各孔加入底物液100μl,室溫保溫15min后,各孔加入終止液50μl。
(4)結果判讀:在酶標儀上以試劑空白校零點,測各孔在492nm光密度值,先計算判斷值,然后判斷結果:
當樣品A值高于判斷值為陰性,低于判斷值為陽性。
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