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硝基四唑氮藍試驗-檢查項目-大眾養生網

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硝基四唑氮藍試驗

基本信息

  • 專科分類:
  • 檢查分類: 免疫檢查
  • 適用性別: 男女均適用
  • 是否空腹:  空腹
  • 手術參考價: 35元
  • 科 室:

硝基四唑氮藍試驗檢查簡介

中性粒細胞在殺菌過程中能量消耗增加,代謝中所脫的氫還原氮藍四唑成為藍黑色的點狀或塊狀物,沉積于粒細胞胞質中,根據細胞內沉積顆粒判斷陽性率。本試驗主要用于檢測中性粒細胞的胞內殺傷功能,可以用于診斷兒童慢性肉芽腫病,以及用于鑒別細菌性和病毒性感染。

硝基四唑氮藍試驗檢查過程

取材:血液

硝基四唑氮藍試驗的測定原理:中性粒細胞在殺菌過程中能量消耗驟增、糖代謝活躍、6-磷酸葡萄糖氧化脫氫成為戊糖。所脫的氫還原淡黃色的硝基藍四氮唑(NBT)成為藍黑色的點狀或塊狀顆粒,沉積于中性粒細胞的胞漿中,其折光性很強,在油鏡下很易識別。

試劑:

(1)2.0g/LNBT生理鹽水溶液:取NBT20mg,加于10ml生理鹽水中,置80℃水浴,攪拌溶解,先用濾紙過濾,再經G6除菌,分裝,放4℃冰箱保存備用。試驗前新鮮配制NBT應用液,取2.0g/LNBT生理鹽水溶液加等量下述緩沖液,混合后即可。

(2)pH7.20.15mol/L磷酸葡萄糖生理鹽水緩沖液:0.15mol/LNa2HPO4,70ml;0.15mol/LKH2PO4,30ml;葡萄糖100mg,混合溶解,過濾,分裝,55.16kPa,高壓滅菌20min,置冰箱保存。

操作方法:

(1)取肝素(100u/ml)抗凝血0.1ml放入凹玻片中,加NBT應用液0.1ml和NBT應用液0.1ml,混勻。置濕盒中,37℃15min(其間振搖1次)再移室溫15min。

(2)取1滴混合液,推成薄片,晾干。

(3)用甲醇固定3min,吹干,加10.0g/L沙黃水溶液染色5min(也可用50.0g/L甲基綠水溶液染色15min,或用姬姆薩-瑞氏染液染色),水洗,晾干。

(4)用顯微鏡檢查,凡中性粒細胞的胞漿內含有斑點狀或塊狀深藍色物質沉著的為NBT陽性細胞,細胞核有不同程度的退行性變,細胞有時腫大。共計數100~200個中性粒細胞,計其NBT陽性細胞百分率。

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