三級(jí)甲等綜合醫(yī)院國營
北京協(xié)和醫(yī)院是集醫(yī)療、教學(xué)、科研于一體的現(xiàn)代化綜合三級(jí)甲等醫(yī)院,是國家衛(wèi)生健康委指定的全國疑難重癥診治指導(dǎo)中心,最早承擔(dān)高干保健和外賓醫(yī)療任務(wù)的醫(yī)院之一,也是高等醫(yī)學(xué)教育和住院醫(yī)師規(guī)范化培訓(xùn)國家 級(jí)
免疫比濁法:
①透射比濁法:
A.抗血清濃度選擇:與參考品進(jìn)行方陣滴定,最適稀釋度的原則為:保持抗體過量,線性范圍較寬,與相應(yīng)Ig反應(yīng)后產(chǎn)生濁度較高。
B.標(biāo)準(zhǔn)曲線:將Ig參考品用稀釋液稀釋成不同濃度:IgG5.0、9.0、13.0、17.0、21.0g/L;IgA1.0、2.0、3.0、4.0、5.0g/L;IgM0.5、1.2、1.9、2.6、3.3g/L。每個(gè)稀釋度設(shè)3支復(fù)管,每管25μl。加入最適稀釋度抗血清,每管2.5ml。37℃水浴1h(IgG)或2h(IgA、IgM)后,用濁度計(jì)或比色計(jì)在495nm測(cè)吸光度。以Ig濃度為橫坐標(biāo),其吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
C.標(biāo)本檢測(cè):檢測(cè)步驟與制備標(biāo)準(zhǔn)曲線相同。測(cè)IgG時(shí),待檢血清1∶40稀釋;測(cè)IgA、IgM時(shí)1∶5稀釋。每批試驗(yàn)同時(shí)制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并設(shè)標(biāo)本對(duì)照(標(biāo)本加稀釋液)和抗血清對(duì)照。
②終點(diǎn)散射比濁法:用專用比濁管加入緩沖液0.6ml、1∶36(測(cè)IgG、IgA、IgM、C3、C4等)或1∶216(測(cè)IgG)稀釋樣品50μl,再加入抗血清50μl,混勻后37℃水浴30min。用激光免疫比濁儀,按預(yù)測(cè)項(xiàng)目(如IgG或IgA)鍵,以空白管(不加抗血清)調(diào)零,按測(cè)定鍵,測(cè)定各管,即顯示所測(cè)項(xiàng)目含量。
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