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胰島素抗體-檢查項目-大眾養生網

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胰島素抗體

基本信息

  • 專科分類: 生長發育檢查
  • 檢查分類: 免疫檢查
  • 適用性別: 男女均適用
  • 是否空腹:  非空腹
  • 手術參考價: 45元
  • 科 室: 生長發育檢查

胰島素抗體檢查簡介

胰島素抗體的出現有兩種情況,一種出現于接受外源性胰島素治療的病人,主要和胰島素制劑的純度有關系,一種出現于從未接受胰島素治療的病人,稱為胰島素自身抗體。

胰島素抗體檢查過程

(1)酶聯免疫吸附法

將胰島素-卵清蛋白用包被液稀釋至20μg/ml,包被聚苯乙烯反應板微孔,每孔100μl,4℃過夜。洗滌液洗3次,每次3min,用pH7.4,0.01mol/LPBS(內含15%小牛血清)封閉,43℃1h。同上法洗后加待測血清(1∶100)或陰性、陽性對照,每孔100μl,43℃1h(37℃2h)。同上法洗后加最適稀釋度的HRP-SPA,每孔100μl,45℃1h(37℃2h)。同上法洗后加底物(OPD-H2O2)溶液,每孔100μl,37℃10min顯色。用2mol/LH4SO4終止反應。

酶聯免疫檢測儀檢測492nm波長吸光度值。

(2)免疫酶斑點法

將NC膜劃成5mm×5mm的小方格,浸于pH7.4,0.01mol/LPBS中30min,濾紙吸干。取2μl胰島素-卵清蛋白交聯物點樣于小方格中央,室溫自然干燥。用pH7.4,0.01mol/LPBS(內含卵清蛋白10.0g/L)封閉,45℃1h,濾紙吸干。加待測血清2μl于抗原包被處,45℃30min后,用pH7.4,0.01mol/LPBS洗3次,每次3min,濾紙吸干。將膜置于最適濃度HRP-SPA中,45℃30min,同上法洗后濾紙吸干。浸于新配底物中5~10min,顯色后流水沖洗,終止反應。

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