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血氨-檢查項目-大眾養生網

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血氨

基本信息

  • 專科分類： 消化
  • 檢查分類： 肝功能檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術參考價： 20元
  • 科　室： 消化

血氨檢查簡介

人體內的氨是蛋白質代謝過程中通過氨基酸脫氨基，腎臟使谷氨酰胺分解和腸道內細菌的作用而生成。大部分氨在肝內通過鳥氨酸循環合成尿素。一部分被用于酮酸的氨基化，合成谷氨酰胺，在腎內形成銨鹽從尿中排出。血氨在診斷治療肝昏迷、肝性腦病中占重要地位，尿中氨測定是估價體內酸堿平衡紊亂的指標之一，血氨的測定方法有離子交換樹脂法、直接法、電極法及酶法，其中酶法以其簡單、特異性高而被廣泛應用。

血氨檢查過程

取材：血液

血氨的測定原理：血漿氨的酶法測定基于下列反應：

在過量α-酮戊二酸、NAD（P）H和足量谷氨酸脫氫脫氫酶（GLDH）條件下，酶促反應的速率，即NAD（P）H轉變成NAD（P）＋使340nm吸光度的下降速率與反應體系中氨的濃度呈正比關系。

試劑：全部試劑必須用去氨水制備。去氨水用蒸餾水經氫型陽離子交換樹脂處理獲得。

（1）66.7mmol/LKH2PO4溶液：取9.12gKH2PO4溶入去氨水中，定溶到1L，4℃保存。

（2）66.7mmol/LNa2HPO4溶液：取9.51gNa2HPO4溶解并加去氨水到1L，4℃保存。

（3）pH8.0（±0.05），66.7mmol/L磷酸鹽緩沖液（PB）：取5ml“1”液及95ml“2”液，混合，4℃保存，穩定3周。

（4）310mmol/Lα-酮戊二酸：取0.45gα-酮戊二酸，溶于5ml去氨水中，用3mol/L氫氧化鈉調pH至接近5.0時，改用0.1mol/L氫氧化鈉調pH至6.8（±0.01），切勿調得過堿，因高pH可破壞α-酮戊二酸，以去氨水稀釋到10ml，4℃穩定10天；

（5）NADPH貯存液：稱約10mgN-ADPH（－20℃、干燥器保存）溶于1mlPB中取出50μl，以PB稀釋到5ml為工作液，以PB調零，1cm光徑，在340nm波長讀NADPH工作液的吸光度，計算NADPH貯存液中實際濃度：

6.22為NADPH的毫摩爾吸光系數，據上式計算結果確定制備GLDH工作液中加入NADPH貯存液的量，使達到149μmol/L。

（6）GLDH工作液：根據GLDH酶制品（－20℃干燥器中保存）的比活，稱出酶活力為992U的相應量（如比活為50U/mg蛋白，則稱20mg），如GLDH在甘油中，可按U/ml吸出992U的相應體積，置50ml量瓶中，稱入ADP（－20℃，干燥器中保存）15mg，吸入計算量的NADPH貯存液，以PB稀釋到50ml，4℃保存可穩定7天；

（7）氨標準貯存液，100mmol/L：稱取（NH4）2SO4660.7mg，溶于去氨水定容到100ml，4℃保存；

（8）氨標準應用液：用去氨水分別稀釋貯存液成25、50、100、及150μmol/L。

操作方法：所用分光光度計需配有37℃恒溫比色系統及340nm波長。如用自動分析儀，可根據本法反應條件自行設計，樣品及試劑用量按比例減少。操作見表1，按B、S、U管先后順序進行。

混勻，于10s時讀A10s于70s時讀A70s，求各管的△A，即△A＝A10s－A70s。

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