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血清谷丙轉氨酶-檢查項目-大眾養生網

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血清谷丙轉氨酶

基本信息

  • 專科分類： 消化
  • 檢查分類： 肝功能檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術參考價： 15元
  • 科　室： 消化

血清谷丙轉氨酶檢查簡介

丙氨酸氨基轉移酶(ALT)是通常所稱谷丙轉氨酶(CPT)，存在于各組織細胞，以肝臟含量最多，其次是心肌細胞內，血清中酶活性很低。當這些組織病變，細胞壞死或通透性增強時，細胞內酶釋放入血，使血清中ALT活性增高。血清ALT測定主要用于肝臟病的診斷。

血清谷丙轉氨酶檢查過程

取材：血液

血清谷丙轉氨酶的測定原理：

（1）比色法測定：ALT催化基質中的丙氨酸和α-酮戊二酸反應，生成谷氨酸和丙酮酸，后者與2，4-二硝基苯肼作用，生成苯腙，在堿性條件下顯色。

（2）連續監測法：在ALT催化的反應中生成的丙酮酸，被LDH還原成乳酸，并使NADH氧化成NAD＋，在340nm波長下吸光度降低，NADH的氧化速率與ALT活力成正比。

試劑：

（1）比色法測定：

①0.1mol/L磷酸鹽緩沖液（pH7.4）。

A液：稱磷酸二氫鉀13.6g，溶于水中，加水至1000ml，冰箱保存。

B液：稱磷酸氫二鈉（含兩個結晶水）17.6g，溶于水中，并加水至1000ml，冰箱保存。

取A液80ml，B液420ml混合，置冰箱內保存即可。

②ALT基質液：精確稱取DL-丙氨酸1.79g和α-酮戊二酸29.2mg，溶于50ml磷酸鹽緩沖液中，用1mol/LNaOH溶液（約0.5ml）校正pH7.4，再加磷酸鹽緩沖液至100ml，可穩定2周。加麝香草酚90mg，可延長使用時間。

③1mol/L2，4-二硝基苯肼（DNPH）溶液：稱取DNPH19.8mg，溶于1000ml1mol/LHCl中，置室溫保存。

④0.4mol/LNaOH溶液：溶解16.0gNaOH于水中，并加至1000ml，置帶塞塑料瓶內，置室溫保存。

⑤2mmol/L丙酮酸標準液：可購買或自配。準確稱取22.0mg丙酮酸鈉（AR），置于100ml容量瓶中，加0.05mol/L硫酸至刻度。

（2）連續監測法：

①基質液的成分和濃度（IFCC）：100mmol/LTris緩沖液（pH7.5），15mmol/Lα-酮戊二酸，500mmol/LL-丙氨酸，0.18mmol/LNADH，0.1mmol/L磷酸吡哆醛，1200U/L乳酸脫氫酶。

②市售試劑盒：按說明書用蒸餾水或稀釋液溶解，用后置冰箱保存，一般可穩定4天。

操作方法：

（1）比色法測定：其基質液37℃預溫，按表1操作。

混勻，置37%水浴20min，各管加0.4mol/LNaOH溶液5ml，混勻，置室溫5min后，在505nm處用對照管調零點，讀取各管吸光度，查標準曲線即得ALT活力單位。

（2）連續監測法：各實驗室可根據本室的分析儀型號及操作說明書而定。主要參數：340nm波長，37℃，樣本與試劑體積比為1∶10。

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