厭氧菌的分離與鑒定

基本信息

專科分類： 生長發育檢查
檢查分類： 生化檢查
適用性別： 男女均適用
是否空腹： 　空腹
手術參考價： 35元
科　室： 生長發育檢查

厭氧菌的分離與鑒定檢查簡介

厭氧菌的分離與鑒定是對氧敏感度高的細菌進行分離與鑒別的試驗，因為厭氧微生物在自然界分布廣泛，種類繁多，其生理作用日益受到人們的重視。專性厭氧菌，對氧氣非常敏感，因此，他們的分離、培養及活菌計數的關鍵是提供無氧和低氧化還原電勢的培養環境。

厭氧菌的分離與鑒定檢查過程

分離

(1)編號

取五支無菌水試管，分別用記號筆標明10-1、10-2……10-5。

(2)稀釋

在無氧無菌的超凈厭氧手套箱中的條件下，用無菌注射器吸取1mL混合均勻的液體樣品，加入裝有預還原生理鹽水的厭氧試管中，用震蕩器將其混合均勻，制成10-1稀釋液。用無菌注射器吸取1mL10-1稀釋液至另一裝有9mL生理鹽水的厭氧試管中，制成10-2稀釋液。依此進行10倍系列稀釋，至10-6，制成不同樣品稀釋液。通常選10-4、10-5、10-6三個稀釋度進行滾管計數。

(3)滾管分離

1)滾管

將無氧無菌的瓊脂培養基在沸水浴中溶化，置46-50℃恒溫的水浴中，待用，當培養基從瓶中取出時，要用N2在培養基內中充氣。再在試管中用N2充氣，趕走所有管內空氣，然后把培養基加入管內，立即塞上瓶塞。待瓶塞塞入管內，及時拔出充氣針頭。用無菌注射器吸取10-4、10-5、10-6三個稀釋度各0.1mL，分別注入待用的試管中，然后將其平放于盛有冰水的瓷盤中迅速滾動，帶菌的溶化瓊脂在試管內壁會即刻形成凝固層。

2)分離純化

生成的菌落需挑取出來，鏡檢其形態及純度。如尚未獲得純培養物，需再次稀釋滾管，并再次挑取菌落，直至獲得純培養物為止。待挑取的單菌落預先在放大鏡下觀察確定，做好標記。然后將培養基試管固定于適當的支架上，打開試管膠塞，同時迅速將氣流適當、火焰滅過菌的氮氣長針頭插入管內。同時，另一液體厭氧管去掉膠塞插入另一滅過菌的通氣針頭。將準備好的彎頭毛細管小心插入固體培養基內，找準待挑菌落，輕輕吸取，轉移至液體試管內，加塞。37℃培養，培養24h或更長時間或待培養液混濁后檢查已分離培養物的純度。

3)劃線分離

將試管橡皮塞的一端在火焰上灼燒一下，挨著打氣針塞住管口，在針頭快速取下前，通氣15-20s，管口一端在火焰上燒片刻。旋緊管塞，劃線后的卷管直立保溫，使用CO2:H2=80:20,因為CO2比空氣重，開啟后管塞不致有空氣殘留。劃線后的滾管，置34-37度下培養，便可長出菌落。

菌種的鑒定

1糖發酵試驗

糖發酵實驗是最常用的生化反應，在腸道細菌鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖的能力上有很大差異，有些細菌能分解糖并產酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);有些細菌只產酸不產氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產酸并產氣;傷寒桿菌能分解葡萄糖產酸不產氣，不能分解乳糖;普通變形桿菌分解葡萄糖產酸產氣，不能分解乳糖。酸的產生可以利用指示劑來斷定。在配制培養基時預先加入溴甲酚紫[pH5.2(黃色)—6.8(紫色)]，當發酵產酸時，可使培養基由紫色變為黃色。氣體的產生可由發酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。

具體實驗步驟：

①將菌液進行適當稀釋，之后在無菌環境下，取一定量的稀釋液注入生化鑒定管中，用無菌封口膜封口。

②將接種后的鑒定管放入厭氧罐中，充足氮氣后放入37℃恒溫培養箱培養。

③24h后觀察各管中液體顏色變化及產氣情況。

2蛋白質分解實驗

①將菌液進行適當稀釋，之后在無菌環境下，取一定量的稀釋液注入生化鑒定管中，用無菌封口膜封口。

②將接種后的鑒定管放入厭氧罐中，充足氮氣后放入37℃恒溫培養箱培養。

③24h后各管分別進行米倫氏反應、吲哚反應、黃色反應和坂口反應等。

3淀粉水解實驗

①將菌液進行適當稀釋，之后在無菌環境下，取一定量的稀釋液注入生化鑒定管中，用無菌封口膜封口。

②將接種后的鑒定管放入厭氧罐中，充足氮氣后放入37℃恒溫培養箱培養。

③24h后于各管中加入適量盧戈氏碘液觀察淀粉的水解情況。

相關醫生
更多>

李秀蓮 主任醫師

未開通

青海省婦女兒童醫院兒科

擅長疾病：新生兒疾病的診斷、治療與護理。
盧秀英 主任醫師

未開通

青海省婦女兒童醫院急救科

擅長疾病：危重病的救治。
席時華 主任醫師

未開通

烏魯木齊市友誼醫院眼底

擅長疾病：青光眼的早期診斷及難治性青光眼的治療，眼底疾病及小兒弱視診治
李晶主任醫師

未開通

烏魯木齊市友誼醫院眼底

擅長疾病：眼科常見病、多發病的診斷、治療，特別是對準分子激光治療近視、青光眼、淚道疾病及眼外傷的治療積累了豐富的臨床經驗

專家推薦

李秀蓮新生兒疾病的診斷、治療與護理。

擅長：主任醫師

著名中醫腫瘤學家及中西醫結合臨床腫瘤學家，現為廣州中醫藥大學第一附屬醫院副院長，醫學博士、教授、博
盧秀英危重病的救治。

擅長：主任醫師

從事兒內、急救專業近四十年，具有豐富的危重癥及疑難雜癥搶救治療經驗。特別擅長各種休克、中毒、抽搐等
席時華青光眼的早期診斷及難治性青光眼的治療，眼底疾病及小兒弱視診治

擅長：主任醫師

從事眼科臨床工作40余年，具有極豐富的臨床經驗及診治疑難眼病的能力，尤其擅長青光眼的早期診斷及難治
李晶眼科常見病、多發病的診斷、治療，特別是對準分子激光治療近視、青光眼、淚道疾病及眼外傷的治療積累了豐富的臨床經驗

擅長：主任醫師

李晶，女，1962年12月生，漢族，陜西人。1985年畢業于新疆醫學院醫療系，學士學位。畢業后分配
熱西提內科心血管疾病的診斷與治療

擅長：主任醫師

1965年畢業于新疆醫學院臨床醫療學，擅長內科心血管疾病的診斷與治療，曾獲自治區優秀專家稱號。全國

疾病科室

更多 >

绞尽奶汁by菊花开-娇小亚裔被两个黑人-娇小萝被两个黑人用半米长-娇小老少配xxxxx-亚洲破处女-亚洲片在线观看

厭氧菌的分離與鑒定-檢查項目-大眾養生網

厭氧菌的分離與鑒定

基本信息

厭氧菌的分離與鑒定檢查簡介

厭氧菌的分離與鑒定檢查過程

相關醫生
更多>

相關醫院

專家推薦

李秀蓮新生兒疾病的診斷、治療與護理。

盧秀英危重病的救治。

席時華青光眼的早期診斷及難治性青光眼的治療，眼底疾病及小兒弱視診治

李晶眼科常見病、多發病的診斷、治療，特別是對準分子激光治療近視、青光眼、淚道疾病及眼外傷的治療積累了豐富的臨床經驗

熱西提內科心血管疾病的診斷與治療

疾病科室

推薦文章

推薦問答

厭氧菌的分離與鑒定-檢查項目-大眾養生網

厭氧菌的分離與鑒定

基本信息

厭氧菌的分離與鑒定檢查簡介

厭氧菌的分離與鑒定檢查過程

相關醫生 更多>

相關醫院

專家推薦

李秀蓮 新生兒疾病的診斷、治療與護理。

盧秀英 危重病的救治。

席時華 青光眼的早期診斷及難治性青光眼的治療，眼底疾病及小兒弱視診治

李晶 眼科常見病、多發病的診斷、治療，特別是對準分子激光治療近視、青光眼、淚道疾病及眼外傷的治療積累了豐富的臨床經驗

熱西提 內科心血管疾病的診斷與治療

疾病科室

推薦文章

推薦問答

相關醫生
更多>

李秀蓮新生兒疾病的診斷、治療與護理。

盧秀英危重病的救治。

席時華青光眼的早期診斷及難治性青光眼的治療，眼底疾病及小兒弱視診治

李晶眼科常見病、多發病的診斷、治療，特別是對準分子激光治療近視、青光眼、淚道疾病及眼外傷的治療積累了豐富的臨床經驗

熱西提內科心血管疾病的診斷與治療